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用硫氰酸胍法取代酚/氯仿/异戍醇-乙醇法提取RNA，该方法是用高浓度的硫氰酸胍裂解纯化的细胞核，它是离液序列高的试剂，解离核酸蛋白质复合物，并在破碎过程中使细胞内核酸酶快速失活，然后通过稠密的CsCI垫层阻止DNA和蛋白质沉降，最后用脲-LiCI纯化回收RNA，该法也适合于从细菌、植物、动物组织里抽提RNA。本方法由Glisin等（1974）、Chirgwin等（1979）和Auffrag与Roageon（1980）等人建立和发展。
a. 把细胞核悬浮在5mol/L硫氰酸觚、5mmol/L Tris-HCl、50mmol/LEDTA、5%（体积分数）2-巯基乙醇（PH=7.0）中，细胞核浓度为（1～5）×107个/mL。
b. 通过超声处理剪切DNA，使其分子量降低。
c. 加固体N-月桂酰（十二酰）肌氨酸钠到2%（质量浓度），当溶解肌氨酸时，把溶液在50℃加热2min。
d. 给高速离心机水平转子的离心管里加5.7mol/L CsCl、50mmol/L EDTA（PH=7.0），再把含RNA溶液铺放在CsC1垫层上。CsC1垫层的体积是硫氰酸胍溶液的0.25倍。
e. 在15℃高速离心24～48h，RNA形成沉淀，而蛋白质和DNA分布在溶液里，如下图所示。
在5.7mol/L CsCL上的细胞核（或整细胞）硫氰酸胍裂解物经高速水平转子离心后内容物分布图解如下图所示。
CsC1屏障法分离RNA
f. 用吸管吸出上清液直到DNA带（可以用透射折射和黏度来判断），倒出剩余溶液，把离心管颠倒放在棉纸上，使之彻底排于，以减少DNA对RNA的污染。
g. 从离心管底部0.5～1.0cm高度处把离心管切掉（把DNA区带占据的位置切掉），把干净的凝胶状RNA沉淀用1~2mL的灭菌水洗出。
h. 加入1/9体积的灭菌3mol/L 乙酸钠（PH=7.0）、2.5倍体积的乙醇。放置于-20℃过夜使RNA沉淀。
i. 在0℃、最大16000g离心10min收集RNA（凯达KH20R-Ⅱ高速冷冻离心机10000r/min），并重新悬浮在70%（体积分数）乙醇里洗沉淀，然后用95%乙醇洗（每次使用离心机的离心的条件都是一样的），再在真空干燥器里或再用干燥氮气使RNA干燥。
j. 除去残留在RNA里的微量DNA是把沉淀重新溶解在0.5mL的灭菌水里，与0.5mL 8mol/L脲、4mol/L LiCI（PH=7.0）混合，混合物在4℃过液，通过离心收集RNA沉淀，按步骤i清洗和干燥。
k. 把RNA沉淀重新悬浮在0.3mol/L乙酸钠（PH=7.0）里，再加2.5倍体积的乙醇-20℃过夜，收集RNA沉淀，按步骤i清洗和干燥。
l. RNA可以脱水储存于-20℃，或者溶解在灭菌水里，分成小份储存于-20℃。
至此，完成了使用凯达离心机对RNA的离心分离提取。
